菌种复壮（羊肚菌菌种如何采集）

羊肚菌菌种如何采集？

菌种生产流程如下 ：羊肚菌选择和采集→组织（孢子）分离→提纯培养→出菇试验→优良一级菌种→复壮培养、菌种扩繁→二级菌种→接种、培养栽培菌种。

1．菌种分离羊肚菌的分离方法与其他食用菌大体相同采用组织分离和孢子分离。

（1）组织分离

选取成熟、具优良长势的羊肚菌子实体在无菌环境中用接种针将组织块接入平皿培养基上获得菌种。

① 培养基制作。配方为马铃薯 200g、葡萄糖 20g、琼脂 18 ～ 20g、磷酸二氢钾 3g、硫酸镁 1.5g、水 1000ml。将培养基装到 500ml 三角瓶中（每瓶装入 200ml）115℃灭菌 30min 后在无菌条件下将培养基倒入平皿中（每个平皿约 20ml）冷却备用。

② 选取头潮、新鲜、健壮、周围幼菇或原基多、朵形圆整、七八分熟的子实体。

③ 菇面用 75% 酒精棉球擦拭消毒。

④ 切取组织块（菌肉）。用手术刀切开种菇在菌盖或菌柄内侧用无菌手术刀或尖嘴镊子取 5mm 见方组织块（菌肉）接于培养基上（如下图所示）。

取组织块

防治培养基上

⑤ 培养。温箱 18℃恒温培养2 天后组织 块 萌 发 待 菌 落 长 到 2cm用接种针选取最优菌落的先端菌丝接入新培养基进行尖端脱毒。将菌丝生长快、产菌核适中、产色素少且晚的分离物挑选出来作为第一代母种保存备用。

组织块萌发

菌种长到2cm

（2）孢子分离

在无菌条件下使孢子在适宜的培养基上萌发成菌丝体而获得纯培养的方法。多孢分离的菌株不能直接用于生产要经过出菇试验。

采集孢子有多种方法如整朵插种菇、三角瓶钩悬和试管琼脂培养基黏附法等此处介绍整朵插种菇法。① 选取头潮、新鲜、健壮、八九分成熟的子实体。

② 采集孢子。将按照组织分离方法消毒子实体的整朵菇插入无菌孢子收集器里在 18℃下培养 2 ～ 3 天后子囊孢子落下形成孢子印 。

采集孢子

③ 孢子分离、培养。无菌条件下将少量孢子移入盛无菌水的三角瓶内稀释成孢子悬浮液其浓度以 1 滴水中含 5 ～ 10 个孢子为宜。用接种环取孢子悬浮液在斜面上划线孢子萌发后菌丝体长在一起。取菌丝块转接新的平皿培养基上18℃避光培养。选取菌丝生长快菌核数量适中产生色素少且晚的培养物用于栽培试验。

什么叫做菌种的退化和复壮？

菌种的退化：主要指生产菌种或选育过程中筛选出来的较优良菌株由于进行接种传代或保藏之后群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。或菌种的一个或多个特性随时间的推移逐步减退或消失的现象一般常指菌株的生活力、产孢能力衰退和目的产物产量的下降。

菌种的复壮：是在菌种已发生衰退的情况下通过纯种分离和测定生产性能等方法从衰退的群体中找出少数尚未衰退的个体以达到恢复该菌原有典型性状的一种措施。

鱼塘调水菌种的培养方法？

专利名称：调水菌的制备和修复水产养殖环境的方法

调水菌是专门针对水产养殖动物的生理、生态特点和养殖水体的水质特点精心选培活菌菌种开发的绿色环保型复合活菌水质改良剂它以从自然界分离的光合细菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌、丝状菌五大类微生物菌群组成的EM菌为主导菌种通过复壮和培养利用微生物菌群在各自生长过程中产生的有益物质互为生长基质采用独特的发酵工艺形成共生和增殖再复配微生物营养保护剂及天然调水剂最后形成一个菌群复杂、功能齐全、结构稳定的复合型微生物水质调节和改良制剂。

功效1、高效分解水体残饵、粪便、动植物尸体和有机碎屑消除底泥污染降低水体BOD指标快速增加水体溶氧解救因缺氧造成的浮头、泛塘等现象；2、消除水中氨基氮、亚硝基氮、硫化氢等有害物质并将其转化为单细胞藻类的营养源促进优良藻类的生长快速培养浮游生物饵料；3、抑制水体致病菌的定植和侵袭杀灭致病因子尤其对水霉菌、鳃霉菌、嗜水气单胞菌等有较强的抑制作用；4、协同消解重金属、农药、藻毒素及化学工业污染降低水体COD指标；5、维持水产动物体内微生态平衡促进其对营养物质的消化吸收提高饲料利用率；6、稳定水体pH值保持水体有益微生物和藻类的种群数量抑制卵藻、微囊藻等有害藻类的生长。

理化性状淡红色液体。

主要成分光合细菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌、丝状菌、维生素、微量元素、糖类、天然调水剂。

有效成分含量每毫升含益生菌20×108个。

使用范围适应于所有海、淡水水产动物育苗池和养成池。

用法用100倍池水稀释后全池均匀泼洒。

用量1、调节水质每亩水面(水深1米)用调水菌250-500毫升直接泼洒每10-15天泼洒一次高温季节或水质恶化时可加倍泼洒。

2、改良水质高密度换水养殖池每次换水后每立方水体用调水菌2毫升直接泼洒。

3、环境处理养殖池注水前用100倍调水菌稀释液均匀喷洒池底和池壁四周。

4、肥水处理每亩水面(水深1米)用调水菌1000毫升配25千克粪便(各种畜禽粪便)混合发酵后投入水体。

5、应激处理遇到浮头或泛塘每亩水面(水深1米)用调水菌5000毫升直接泼洒。

注意

1、投放“调水菌”前三天后五天内禁止使用有杀菌作用的化学药品及抗生素药物；2、“调水菌”底部稍有沉淀或浮有少量白沫均属正常使用前先将桶内菌液摇匀后再开盖使用；3、使用“调水菌”要即配即用如有剩余应密封保存发现气味不酸或腐臭说明已变质勿再使用；4、使用本品不受天气、光照和水温影响大风、暴雨前夕泼洒使用效果更好；5、制作“调水菌”稀释液或发酵料时最好用井水若用自来水应除氯或放置24小时后使用；6、本品使用安全使用三天后随时可以换水。

发明内容本发明微生态制剂及其制备方法按如下步骤①取蛋白胨5％红糖20％磷酸二氢钙10％硫酸镁1％氯化钾5％氯化钠5％矿物元素4％水50％制成培养液备用。

②取EM菌种和①培养液按1∶49的比例倒入发酵罐中保持pH4.0-5.0温度23-28℃厌氧发酵培养4-10天待料发出略带酸甜的浓郁酒曲香味表明发酵成功制得EM菌菌液备用。

③80目筛选的黄原胶备用。

④取③备用的黄原胶按0.1-0.3％添加量加入EM菌菌液中搅拌均匀放置2小时后装瓶。

本发明具有操作性强成本低廉效果显著对水环境无二次污染对水产养殖动物无毒副作用对水产养殖底质环境有明显修复功能等优点是顺应当今社会回归自然珍惜水和生命追求绿色食品发展健康养殖实现健康消费的必由之路。

权利要求

本发明水产微生态制剂调水菌的制备方法按如下步骤①取蛋白胨5％红糖20％磷酸二氢钙10％硫酸镁1％氯化钾5％氯化钠5％矿物元素4％水50％制成培养液备用。

②取EM菌种和①培养液按1∶49的比例倒入发酵罐中保持pH4.0-5.0温度23-28℃厌氧发酵培养4-10天待料发出略带酸甜的浓郁酒曲香味表明发酵成功制得EM菌菌液备用。

③80目筛选的黄原胶备用。

④取③备用的黄原胶按0.1-0.3％添加量加入EM菌菌液中搅拌均匀放置2小时后装瓶。

全文摘要

调水菌是专门针对水产养殖动物的生理、生态特点和养殖水体的水质特点精心选培活菌菌种开发的绿色环保型复合活菌水质改良剂它以从自然界分离的光合细菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌、丝状菌五大类微生物菌群组成的EM菌为主导菌种通过复壮和培养利用微生物菌群在各自生长过程中产生的有益物质互为生长基质采用独特的发酵工艺形成共生和增殖再复配微生物营养保护剂及天然调水剂最后形成一个菌群复杂、功能齐全、结构稳定的复合型微生物水质调节和改良制剂。

文档编号C02F3/34GK101082028SQ20061002718

公开日2007年12月5日 申请日期2006年6月1日 优先权日2006年6月1日

发明者邹国忠 申请人:上海泓宝绿色水产科技发展有限公司