国学经典,永久流传《诗经朗诵全集》
《诗经朗诵全集》带你领略国学经典,永久咏传。...
2023-07-31
通过同一种DNA限制酶切割T-DNA-目的基因和染色体DNA使两者有互补的碱基序列再用DNA连接酶链接这样就把T-DNA-目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上了
载体是农杆菌中特有的Ti-质粒,受体细胞是大多数的双子叶植物细胞和裸子植物细胞
农杆菌侵染植物首先是吸附于植物表面伤口受伤植物分泌的酚类小分子化合物可以诱导Vir基因的表达。Vir产物能诱导Ti质粒产生一条新的T-DNA单链分子。此单链分子从Ti质粒上脱离后可以与Vir产物VIRD 2 蛋白共价结合并在VIRD 4和VIRB等蛋白的帮助下从农杆菌进入植物细胞的染色体中。
基因克隆载体必须具备三个条件具有能使外源DNA片段插入的克隆位点;能携带外源DNA进入受体细胞或游离在细胞质中进行自我复制或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制;必须具有选择标记以便筛选承载外源DNA的受体细胞。
目前原核受体细胞的载体主要有细菌质粒(松弛型)和λ噬菌体两类真核细胞受体的载体主要有SV40病毒(用于动物转化)和Ti质粒(用于植物转化)。
(1)具有自主复制的能力;
(2)携带易于筛选的选择标记;
(3)含有多种限制酶的单一识别序列以供外源基因的插入;
(4)除保留必要序列外载体应尽可能小便于导入细胞和进行繁殖;
(5)使用安全应只存在的宿主在体内不进行重组不发生转移不产生有害性状并且不能离开工程宿主自由扩散
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